细胞培养是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养本身就是细胞的克隆，克隆的细胞能够保持生物学的稳定统一、单一。
细胞培养的形式可以简单分为2D和3D两种。2D就是平面培养，让细胞沿着一个平面生长。3D就是立体培养，让细胞在立体环境中生长。2D的好处就是细胞平面铺开便于观察、细胞便于更换营养液、利于标准化实验。3D则更贴近人体生长环境，虽然成本较高，但是随着技术的进步3D必将逐步取代2D培养。虽然2D和3D的细胞培养对于细胞的空间分布有所不同，但是对于细胞的其他因素都大同小异。
环境因素
1.无菌
无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内，解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。
2.温度
一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37～38℃，不适宜的环境温度会影响细胞的生长。细胞对低温的耐受能力要强于对高温的耐受能力，在低温下，细胞的代谢活力及核分裂能力降低。若温度不低于0℃，虽然细胞代谢受到影响，但无损伤作用；25～35℃时，细胞以缓慢的速度生长；但若被置于40℃数小时，则不仅不利于细胞生存、生长，甚至可导致其死亡。
3.渗透压
高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。因此，渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。多数体外培养的细胞对渗透压都有一定的耐受能力，实际应用中，260～320mmol/L的渗透压可适用于大多数细胞。
4.PH
细胞的体外培养需要理想的气体环境，氧气、二氧化碳是细胞生存的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环，为细胞生存、代谢与合成提供能量；二氧化碳既是细胞的代谢产物，是细胞生长的必需成分，又与维持培养液的pH有关。大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。
营养因素
1.培养基
细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质，包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。针对不同细胞的营养需求，有多种合成培养基可供选择，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。
2.特殊成分
除了上述一般培养基外，由于细胞的种类繁多，我们往往需要添加对应的血清、因子、氨基酸等。
细胞因素
1.细胞的生长密度
细胞间是存在细胞通讯的。低密度时由于细胞间的通讯减少，细胞的生长减慢，有时甚至不生长（废了）。高密度时由于细胞间的接触抑制或营养争夺，导致细胞的生长减慢、细胞死亡。
2.细胞生长代数
对于原代细胞，由于其增值能力弱，通常在6代后就会停止增值生长。对于细胞系，由于多种偶发因素影响（冻存操作损伤，培养环境突变等）会导致细胞的生长停滞（俗称：老了）。
器材因素
没错，有钱能使鬼推磨。好的实验器材、实验设施能够极大减少意外情况的发生、更利于附着生长、更通畅的气体交换、更精准的环境控制等等等等.....
