接受免疫治疗的患者一旦从免疫治疗中获益，这种益处就能持续存在。这部分癌症患者之所以能从免疫治疗中长期获益，很大一部分原因在于记忆性CD8 T细胞提供的长期免疫监视能力。
近日，由哈佛大学Dana Farber癌症研究所Stephanie K. Dougan领衔的研究团队，在著名期刊 Cancer discovery 上发表了一项出人意料的研究成果。他们发现： 治疗乳腺癌的CDK4/6抑制剂竟然可以促进记忆性CD8 T细胞的形成。
这意味着： 如果在使用免疫检查点抑制剂之前使用CDK4/6抑制剂，或许可以增强免疫治疗的效果。
https://doi.org/10.1158/2159-8290.CD-20-1540
CDK4/6抑制剂主要通过控制细胞周期发挥抗癌功效。然而研究表明CDK4/6同样对肿瘤免疫微环境发挥重要作用，CDK4/6抑制剂可以上调肿瘤细胞表面PD-L1的表达，可以提高乳腺癌的抗原提呈基因表达，减少Treg、MDSC细胞的在肿瘤微环境中的占比，增加CD4T、CD8T细胞在肿瘤微环境中的占比。
其中CDK4/6抑制剂与PD-L1抑制剂的联合使用在动物实验中具有很好的抗癌效果，但是由于其在临床实验中的强烈副作用，使其无法进一步发展。
为了确定CDK4/6抑制剂对肿瘤特异性CD8T细胞的影响，Dougan教授团队从TRP1（黑色素瘤抗原酪氨酸酶相关蛋白1）转基因小鼠中分离了TRP1特异性CD8T细胞，在体外用palbociclib（CDK4/6抑制剂）刺激它们，48小时后将这些细胞过继转移到接种黑色素肿瘤的小鼠身上，六天后，手术切除该侧肿瘤，再让小鼠休息30天。目的是让效应CD8T细胞减少，留下记忆性CD8T细胞。
30天后，研究人员又在小鼠另一侧构建黑色素肿瘤模型，尝试用B16肿瘤再次激发抗肿瘤免疫。他们发现， 接受palbociclib处理过的CD8T细胞组小鼠比空白对照组小鼠表现更好，完全排斥肿瘤的小鼠比例更高，而且其脾脏中TRP1 high CD8T细胞的数量更多
为了进一步确定接受palbociclib全身治疗的小鼠是否可以观察到免疫记忆增强，Dougan教授团队在给小鼠口服palbociclib 7天后，在脾脏中检测抗原特异性CD8T细胞上IL-7Rα的表达情况。他们发现，与对照组相比，palbociclib治疗组小鼠抗原特异性CD8 T细胞上IL-7Rα表达水平更高。这表明记忆前体细胞水平增加。由此可以得出结论： CDK4/6抑制剂可促进记忆性T细胞的形成。
为了排除palbociclib诱导CD8T细胞的长期持续存在与细胞周期无关，作者选取了多种细胞周期抑制剂进行对比。
接下来他们从小鼠脾脏中分离出CD8T细胞，将这些细胞分成两组，一组用palbociclib处理，一组不用palbociclib处理，并用抗CD3/28磁珠活化48小时。48小时后，研究人员分别给两组细胞做了RNA测序，结果发现 两组细胞中差异最大的基因是Mxd4。
Mxd4属于一个转录因子家族，与Myc的专性异二聚体伴侣Max相关。Mxd4与Max的结合使Max远离Myc，并抑制Myc靶基因的转录。Dougan教授团队观察到：在CDK4/6抑制剂存在下，激活的CD8T细胞中Myc靶基因表达明显下调，尽管Myc转录水平保持不变。
经过深入研究后，Dougan教授团队最终发现：在小鼠实验中，CDK4/6抑制剂是通过增加小鼠的CD8T细胞的Mxd4，继而沉默Myc，从而导致其转向记忆潜能细胞。
为了验证人类身体中也会发生这种机制，Dougan教授团队先从健康献血者外周血中分离出CD8T细胞，并在空白对照或palbociclib存在下，用抗CD3/28磁珠体外活化CD8T细胞，48小时后检测细胞的IL7Rα和CD7的表达水平。
人体结果显示的结果与小鼠一致， 经过palbociclib处理的CD8T细胞增加了向记忆前体CD8 T细胞转化的的数量。
同样在人体中，48小时后对细胞进行进行RNA测序，相较于不加palbociclib组，加入palbociclib时激活的CD8T细胞在基因表达水平上Mxd4是最大的差异基因。
Dougan教授团队最终得出结论： CDK4/6抑制剂是通过上调小鼠和人CD8T细胞中的Mxd4，进而导致的Myc活性下降，从而诱导出一种记忆前体表型的CD8T细胞。
在研究的最后，Dougan教授团队还 收集了乳腺癌患者使用CDK4/6抑制剂前后的血液样本，进行更高级的单细胞测序和TCR克隆追踪，结果提示CDK4/6抑制剂可能增强癌症患者的长期保护性免疫。
